“化学发光仪器跳值”你知道多少?

一、跳值的定义与表现形式是什么?

跳值的定义为样本及检测系统所导致的非重现性假阳或初测假阳性。测试结果表现为RLU偏高,经过重复测试,结果趋于正常;且该现象的重现性低,与系统的精密度无关。

跳值的表现形式为针对样本管的首次测定,RLU值偏高。跳值这个现象同时发生在多种使用不同的方法学的仪器平台上,如酶联免疫吸附检测、放射免疫检测、化学发光、电化学发光。据有关资料数据显示,国内外化学发光仪器厂家的检测系统均有跳值问题的报道。

二、关于发光仪器跳值概率,市场数据调研

肌钙蛋白

发光仪器跳值概率



于相关文献:

Outliers as a Cause of False Cardiac Troponin Results:Investigating the Robustness of 4 Contemporary AssaysClinical Chemistry201157:5710–718

Comparison of cardiac TnI outliers using a contemporary and a high-sensitivity assay on the Abbott Architect platformAnnals of Clinical Biochemistry2014, Vol. 51(4) 507–511

Evidence on the cause of false positive troponin I results with the Beckman AccuTnI methodClin Chem Lab Med 2011;49(6):1079–1080

三、跳值发生的原因

关于跳值,相关文献报道的主要因素集中在:

1)分析前因素;比如:病人本身潜在干扰、样本凝血时间、凝集温度、离心条件、样本采集管。

2)仪器检测状态因素;比如:仪器保养周期、仪器维护效果等等。

 

.分析前因素

病人本身(潜在干扰物质)。

1. 饮食因素:例如特殊饮食,摄入过量动物内脏引起铁蛋白升高,食用动物甲状腺和含碘物质,会引起甲状腺激素变化、高蛋白摄入引起泌乳素PRL等项目受到影响;

2. 运动因素:例如剧烈运动引起体内激素分泌增加,汗液析出,进一步加大激素浓度升高;

3. 节律性影响:TSHTESTOPRL分泌有明显的昼夜节律,LH周期呈脉冲式分泌,hGH在入睡后出现短时高峰。建议采血时间早上8-10时。

 

【样本采集管】

1. 采血管的材质、添加剂(不同厂家采血管质量不同,对于免疫项目影响不同;推荐使用BD采血管。

 

【样本采集质量】

1. 抽血量是否满足标识体积;

2. 抽血后是否及时颠倒混匀。

 

【样本前处理】

1. 血清标本的凝集时间不足;凝集温度不符合规范要求。

2. 样本离心时间不足;离心力设置较小。

3. 此外,当涉及样本的运送时,是否按照规定要求的运输温度及相应的时间限制运输。是否将样本从凝块、血清分离胶或红细胞中分离出来。

 

2 样本凝血时间与跳值概率关系


由上图实验可看出凝血效果是否充分对跳值影响十分明显。如实验使用的为无添加剂的普通真空管,则一般厂家说明书上要求凝血时间为2h以上;如果使用含促凝剂的血清管,则按照说明书要求,需要凝血30 min以上。

3 样本离心条件与跳值概率关系


由上图实验可看出,增加离心时间可大大降低发生异常值的概率。离心时间和离心转速需要严格依照厂家说明书上推荐。

 

【样本检测】

1. 样本体积样本体积过少可能会导致样本针吸取到凝胶血细胞等)

 

.仪器检测状态因素

【仪器保养周期】

1. 若仪器使用年限较长,考虑缩短保养周期;

2. 若仪器每日测试量较大,考虑缩短保养周期。

 

【仪器维护效果】

1. 须严格按照厂家与实验室提供的仪器保养维护作业指导书 执行仪器维护的各项标准要求。

 

四、改善措施

1.控制样本采血质量

①保证真空采血管的质量;

②采血后5~10次的温柔颠倒混匀可以促进血块的快速和完全凝结;且达到血液凝集时间的最低要求。

③建议采血后采血管上机离心前保持垂直竖立;减少采血管中标本搅动,降低溶血可能性;防止凝血过程中产生的纤维蛋白附着于离心管盖上,离心后被推到凝胶上方污染血清。

 

2.将样本转移到微量杯中进行检测

针对样本量较少标本需要转移到微量杯测试,样本转移时用移液器避免倾倒,避免吸取血小板及血细胞。

3.离心时间及转速

严格按照厂家说明书要求设置离心时间及转速。

4.加强仪器维护保养

①清洁样本针/试剂针外壁;(每天)

②清洁磁分离吸液针外壁;(每天)

③日常清洁/执行自动检测(每天):【仪器设置:自动维护 ,确认使用强化清洗剂进行日常清洁】;

④周期性更换并清洗磁分离吸液针,且更换下来的吸液针按要求冲洗,并晾干。
a、按时间周期-每季度;b、按样本测试周期-常规项目每50000个测试;

⑤液路灌注。(不定期)

⑥核查重要部件的参数位置。(试样针/清洗盘)

 

五、总结

任何检测平台跳值问题都是不可避免,做好仪器保养维护、规范样本前处理操作,可有效降低跳值问题。