跳值的定义为样本及检测系统所导致的非重现性假阳或初测假阳性。测试结果表现为RLU偏高,经过重复测试,结果趋于正常;且该现象的重现性低,与系统的精密度无关。
跳值的表现形式为针对样本管的首次测定,RLU值偏高。跳值这个现象同时发生在多种使用不同的方法学的仪器平台上,如酶联免疫吸附检测、放射免疫检测、化学发光、电化学发光。据有关资料数据显示,国内外化学发光仪器厂家的检测系统均有跳值问题的报道。
【肌钙蛋白】
表1 发光仪器跳值概率
源于相关文献:
①Outliers as a Cause of False Cardiac Troponin Results:Investigating the Robustness of 4 Contemporary Assays,Clinical Chemistry,2011,57:5710–718;
②Comparison of cardiac TnI outliers using a contemporary and a high-sensitivity assay on the Abbott Architect platform,Annals of Clinical Biochemistry,2014, Vol. 51(4) 507–511;
③Evidence on the cause of false positive troponin I results with the Beckman AccuTnI method,Clin Chem Lab Med 2011;49(6):1079–1080
关于跳值,相关文献报道的主要因素集中在:
(1)分析前因素;比如:病人本身潜在干扰、样本凝血时间、凝集温度、离心条件、样本采集管。
(2)仪器检测状态因素;比如:仪器保养周期、仪器维护效果等等。
Ⅰ.分析前因素
【病人本身】(潜在干扰物质)。
1. 饮食因素:例如特殊饮食,摄入过量动物内脏引起铁蛋白升高,食用动物甲状腺和含碘物质,会引起甲状腺激素变化、高蛋白摄入引起泌乳素PRL等项目受到影响;
2. 运动因素:例如剧烈运动引起体内激素分泌增加,汗液析出,进一步加大激素浓度升高;
3. 节律性影响:TSH、TESTO、 PRL分泌有明显的昼夜节律,LH周期呈脉冲式分泌,hGH在入睡后出现短时高峰。建议采血时间早上8-10时。
【样本采集管】
1. 采血管的材质、添加剂(不同厂家采血管质量不同,对于免疫项目影响不同;推荐使用BD采血管。)
【样本采集质量】
1. 抽血量是否满足标识体积;
2. 抽血后是否及时颠倒混匀。
【样本前处理】
1. 血清标本的凝集时间不足;凝集温度不符合规范要求。
2. 样本离心时间不足;离心力设置较小。
3. 此外,当涉及样本的运送时,是否按照规定要求的运输温度及相应的时间限制运输。是否将样本从凝块、血清分离胶或红细胞中分离出来。
表2 样本凝血时间与跳值概率关系
由上图实验可看出凝血效果是否充分对跳值影响十分明显。如实验使用的为无添加剂的普通真空管,则一般厂家说明书上要求凝血时间为2h以上;如果使用含促凝剂的血清管,则按照说明书要求,需要凝血30 min以上。
表3 样本离心条件与跳值概率关系
由上图实验可看出,增加离心时间可大大降低发生异常值的概率。离心时间和离心转速需要严格依照厂家说明书上推荐。
【样本检测】
1. 样本体积(样本体积过少可能会导致样本针吸取到凝胶血细胞等);
Ⅱ.仪器检测状态因素
【仪器保养周期】
1. 若仪器使用年限较长,考虑缩短保养周期;
2. 若仪器每日测试量较大,考虑缩短保养周期。
【仪器维护效果】
1. 须严格按照厂家与实验室提供的仪器保养维护作业指导书 执行仪器维护的各项标准要求。
1.控制样本采血质量
①保证真空采血管的质量;
②采血后5~10次的温柔颠倒混匀可以促进血块的快速和完全凝结;且达到血液凝集时间的最低要求。
③建议采血后采血管上机离心前保持垂直竖立;减少采血管中标本搅动,降低溶血可能性;防止凝血过程中产生的纤维蛋白附着于离心管盖上,离心后被推到凝胶上方污染血清。
2.将样本转移到微量杯中进行检测
针对样本量较少标本需要转移到微量杯测试,样本转移时用移液器避免倾倒,避免吸取血小板及血细胞。
3.离心时间及转速
严格按照厂家说明书要求设置离心时间及转速。
4.加强仪器维护保养
①清洁样本针/试剂针外壁;(每天)
②清洁磁分离吸液针外壁;(每天)
③日常清洁/执行自动检测(每天):【仪器设置:自动维护 ,确认使用强化清洗剂进行日常清洁】;
④周期性更换并清洗磁分离吸液针,且更换下来的吸液针按要求冲洗,并晾干。
a、按时间周期-每季度;b、按样本测试周期-常规项目每50000个测试;
⑤液路灌注。(不定期)
⑥核查重要部件的参数位置。(试样针/清洗盘)
任何检测平台跳值问题都是不可避免,做好仪器保养维护、规范样本前处理操作,可有效降低跳值问题。